作者：江秀玲; 毕富勇; 王华茂; 石必枝; 张捷; ...nih3t3稳定细胞系免疫原性抗体
摘要：目的：建立表皮生长因子突变体Ⅲ胞外区（EGFRvⅡ-Iex）的NIH3T3稳定细胞系并分析其免疫原性。方法：将编码EGFRvⅢex基因的表达质粒pLNCX2-EGFRvⅢex转染NIH3T3细胞后,用G418筛选阳性克隆,得到多个细胞克隆。采用免疫组化和Western blot法鉴定这些细胞克隆。选取高表达EG-FRvⅢex的细胞株（命名为3T3-vⅢex）免疫BALB/c小鼠,制备抗血清。用ELISA、Western blot和免疫荧光分别检测抗血清的效价和特异性。结果：成功地构建了真核表达载体pLNCX2-EGFRvⅢex并获得了稳定高表达EGFRvⅢex的NIH3T3细胞系3T3-vⅢex。用3T3-vⅢex免疫小鼠所获得的抗血清效价为10-5。Western blot和免疫荧光鉴定证明抗血清可以与EGFR-vⅢex特异结合。结论：人EGFRvⅢex可在NIH3T3细胞内获得稳定表达,以其免疫小鼠可以获得高效价、高特异性的抗血清。
注：因版权方要求，不能公开全文，如需全文，请咨询杂志社
