作者:刘佳梅; 陈东; 孟晓婷克隆重组逆转录病毒载体变异体
摘要:目的: 构建大鼠Islet-1基因逆转录病毒表达载体, 利用此载体将Islet-1基因转导入神经干细胞(NSC)内.方法: 利用RT-PCR技术钓取大鼠Islet-1基因, 将其插入到逆转录病毒载体plEGFP-C1中, 利用包装细胞PA317将Islet-1基因转导入NSC内, 观察Islet-1基因在NSC内的表达.结果: 经PCR、酶切及荧光检测等证实, 成功构建了plEGFP-C1-Islet-1表达载体, 并应用免疫组化技术证明Islet-1在NSC内有表达.在实验中首次发现了Islet-1基因的变异体.结论: 重组Islet-1基因逆转录病毒载体的构建为进一步探讨Islet-1基因是否参与NSC向运动神经元分化及其可能的作用机制奠定了坚实的实验基础.
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