作者:徐军; 吴凡; 韩琳; 吴鹏; 张忠金黄色葡萄球菌蛋白a基因克隆表达
摘要:目的:构建携带Staphylococcal protein A(SPA)基因的原核表达载体,诱导表达具有活性的SPA。方法:用PCR从金黄色葡萄球菌基因组中扩增SPA基因并克隆人pET32a(+)载体中,在大肠杆菌BL21(DE3)中表达。表达产物经亲和层析进行纯化:结果:所构建的原核表达载体为高效表达载体,工程菌表达的SPA约占菌体总蛋白的40%,经亲和层析纯化后获得SPA,纯度达到99%。结论:成功地建市了制备及纯化SPA的方法,为SPA大晕生产以及构建SPA融合表达体系奠宁了基础。
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