作者：杨军; 高天文; 王刚; 王雷; 沈柱; 李春英黑素瘤细胞噬菌体抗体库患者长期存活重链筛选pbmc库容量总rnapcr扩增
摘要：目的:构建噬菌体抗体库并筛选抗黑素瘤细胞的人抗体.方法:从1例长期存活的黑素瘤患者的外周血中分离单个核细胞(PBMC),提取总RNA,并逆转录为cDNA.用PCR扩增多样性κ链基因和重链Fd段基因,分别构建κ链库和重链库,组合为Fab段噬菌体抗体库,用两种黑素瘤细胞系对抗体库进行筛选和鉴定.结果:所构建的噬菌体抗体库的库容量达1.2×108,用两种黑素瘤细胞系进行亲和吸附筛选,获得针对其中1种黑素瘤细胞系的特异性抗体.结论:采用噬菌体抗体库技术,成功地从1例长期存活的黑素瘤患者体内克隆到特异性抗黑素瘤细胞的抗体,为进一步的研究和应用奠定了基础.
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