作者：王长军; 唐家琪; 陶开华; 李先富; 白薇; ...汉滩病毒噬菌体肽文库单克隆抗体抗原表位
摘要：目的:应用噬菌体12肽文库筛选抗汉滩病毒单抗(mAb)F3、B11的模拟配体肽,并对其免疫学特性进行初步分析.方法:以纯化的mAb为筛选配基,进行噬菌体肽库的生物亲和淘选.用ELISA法鉴定筛选克隆的结合活性,对阳性克隆进行序列测定和分析.用动物免疫试验初步分析噬菌体颗粒展示的抗原肽的免疫特性.结果:通过3～4轮生物淘选,ELISA显示筛选到的多数噬菌体克隆均可与mAb特异性结合;与mAbF3结合的阳性克隆的氨基酸序列高度一致,均为-MHG-PTKNQMWHT,与HTNV/SEOV M蛋白G2区第750～759位氨基酸具有较高的同源性;而mAb B11特异性的结合肽在氨基酸水平上表现出一定的多态性,其序列的基序尚未能确定;动物免疫试验表明,噬菌体肽抗原具有良好的免疫反应性和免疫原性,是天然病毒抗原较好的免疫原模拟物.结论:获得了具有良好结合活性的模拟表位肽,为基于表位的HFRSV多肽疫苗及DNA疫苗的研制奠定了基础.
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