作者：李霞; 王彦方; 陈战巧; 俞颂平丹酚酸a沉默信息调节因子3超氧化物歧化酶2细胞损伤视网膜色素上皮细胞
摘要：目的:探讨SIRT3在丹酚酸A(SalA)抗紫外线诱导视网膜色素上皮细胞损伤中的作用及其机制。方法:将ARPE-19细胞分为对照(SalA)组、UV组、SalA+UV组、SalA+UV+阴性si-RNA组、SalA+UV+si-SIRT3组,UV照射剂量为30mJ/cm2,SalA浓度为50μmol/L,采用MTT法检测细胞存活,DCFH-DA法分析细胞内ROS水平,CuZn/Mn-SOD活性检测试剂盒(WST-8法)检测SOD2活性,Westernblot分析SIRT3、SOD2、Bcl-2、Bax、cleaved-Caspase3、Cytc的表达,RT-qPCR法检测细胞内SIRT3和SOD2的mRNA表达情况。结果:UV处理后,ARPE-19细胞内SIRT3蛋白和mRNA表达量降低,经5、25、50μmol/L预处理后,SIRT3表达量明显增加。与对照组相比,UV组细胞凋亡率,ROS含量,Bax、cleaved-Caspase3、Cytc表达量明显增加,细胞存活率、SOD2表达量和活性明显降低。与UV组相比,SalA+UV组细胞凋亡率,ROS水平,SIRT3、cleaved-Caspase3、Cytc表达量明显降低,细胞存活率、SOD2表达量和活性明显增加。与SalA+UV相比,SalA+UV+si-SIRT3组细胞凋亡率,ROS水平,SIRT3、cleaved-Caspase3、Cytc表达量明显增加,细胞存活率、SOD2表达量和活性明显降低。结论:SalA可增加SIRT3的表达,恢复SOD2活性,降低UV诱导细胞损伤作用。
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