作者：张琴 薛向阳 夏克栋 李文姝 陈韶 张丽芳疱疹病毒4型人潜伏膜蛋白2a原核表达重组遗传
摘要：目的：构建含EB病毒（Epstein-Barr virus,EBV）潜伏膜蛋白（LMP）2A N端1-119基因的重组质粒,探讨其在原核表达系统中的表达情况。方法：采用RT-PCR方法从B95-8细胞中获得LMP2A1-119外显子基因片段,并克隆到pGEX-4T-1原核表达载体,转化大肠杆菌BL21（DE3）后,经IPTG诱导表达融合蛋白,通过Ni-NTA离子交换柱层析纯化,进一步采用SDS-PAGE和Western blot鉴定。结果：pGEX/LMP2A1-119重组质粒构建成功,并在大肠杆菌中得到表达。SDS-PAGE结果表明表达产物相对分子质量约为50 kD,West-ern blot结果证实其为目的蛋白。结论：EBV LMP2A1-119蛋白可在pGEX-4T-1原核表达系统中表达,为进一步研究其免疫学特性打下了基础。
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