作者：刘庆 滕艳霞 牛勇 刘清君 段化伟 宾萍 郑...eb病毒永生细胞系环孢霉素ab淋巴细胞三氯乙烯职业卫生
摘要：目的探讨人类疱疹病毒（EBV）转化外周血B淋巴细胞试验的影响因素。方法用B95-8细胞制备EBV,实时荧光定量-PCR（realtime-PCR）法测定EBV滴度以确保病毒有效性,Ficoll密度梯度离心法分离外周血单个核细胞,研究环孢霉素A（CSA）的浓度、CSA加入时间、淋巴细胞浓度3个因素对EBV转化外周血B淋巴细胞试验的影响,选择最优化条件对三氯乙烯接触工人的B淋巴细胞进行转化。结果制备的病毒滴度分别为5.45×10^6/ml和1.06×10^6/ml。不同浓度CSA（0.2、1和2μg/ml）作用以及不同加入时间（同时加入或2h后）B淋巴细胞均成功永生化;正常人B淋巴细胞转化时淋巴细胞浓度不低于2×10^6/ml时方能成功永生化,而接触三氯乙烯工人的淋巴细胞在1×10^6/ml浓度下亦转化成功。不同条件下转化成功的B淋巴细胞永生化细胞系在形态上无明显差别,显微镜下可见B淋巴细胞体积增大并聚集成团。结论在建立B淋巴细胞永生化细胞系的过程中,CSA浓度和加入时间对转化结果未见影响,而淋巴细胞与EBV接触时的细胞浓度是影响实验成败的关键因素,接触三氯乙烯工人的B淋巴细胞在1×10^6/ml浓度下亦转化成功,推测与淋巴细胞致敏状态有关。
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