作者:严丽萍; 陶茂萱血清饥饿接触抑制同步化流式细胞术
摘要:目的 评价血清饥饿和接触抑制两种方法对细胞周期G0期同步化效果,并分析再进入细胞周期各期的时点。方法 利用体外细胞培养技术,采用流式细胞术分析人胚肺成纤维细胞血清饥饿0~48h以及恢复血清培养0~24h内细胞周期分布改变;分析接触抑制3天及传代后24h钿胞周期分布改变。结果 血清饥饿48h后能够达到较好的同步化效果,血清再刺激16h细胞进入细胞周期进程,G1期的细胞在16h后明显减少,24h时达到最低点;S期的细胞在16h后明显增加,于20h左右达到峰值;G2期的细胞在20h时增加明显,24h时达峰值。接触抑制同步化3天后G0达83.36%,传代后,G1期的细胞在13h后逐渐减少,S期的细胞在13h后逐渐增加,于22h时达峰值,G2期的细胞在19h后逐渐增加,25h时达峰值。结论血清饥饿48h或者接触抑制3天均能使体外培养人胚肺成纤维细胞达到G0期同步化状态,恢复血清16h和传代后13h细胞逐渐进入周期。血清饥饿法要优于接触抑制法。
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