作者：陈旺; 李艳; 吴云锋染色体dna分离纯化差速离心脉冲电泳
摘要：【目的】分离小麦蓝矮（WBD）植原体染色体DNA,并建立WBD植原体染色体分离纯化体系。【方法】采用差速离心和脉冲电泳（PFGE）方法富集纯化WBD植原体染色体DNA,并通过PCR和Southern blot进行检测验证,实时荧光定量PCR方法对分离纯化效果进行定量检测。【结果】脉冲电泳凝胶中出现一条大小约为650 kb的条带,经PCR检测和Southern blot分析表明该条带为WBD植原体的染色体DNA。实时荧光定量PCR检测结果表明采用差速离心与脉冲电泳结合的方法可以将WBD植原体基因组的相对拷贝数提高436.5倍。【结论】采用差速离心与脉冲电泳法结合可以有效地从感染WBD长春花中分离到纯的WBD植原体染色体DNA,WBD植原体染色体DNA大小约为650 kb。
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