作者：魏波; 廖翔; 周围; 王羽; 李玉霞; 高原; ...分子伴侣groel
摘要：肠出血性大肠杆菌0157：H7是一种重要的致病菌，加深其致病机理的基础研究将为相关疫苗研究及疾病控制等提供新的思路和依据。串联亲和纯化（TAP）技术是最近发展的分离纯化天然状态蛋白质复合物进而研究蛋白质相互作用的新方法。用我们自己构建的原核表达串联亲和标签载体，在大肠杆菌0157：H7中表达了标签融合蛋白GroEL-TAP,建立了非变性条件下制备蛋白复合物的方法，并且对串联亲和纯化过程中的相关实验条件进行了探索和优化，最终得到了高纯度的GroEL—TAP与天然GroEL形成的嵌合型多聚体复合物。这表明我们建立的串联亲和纯化技术能高度特异地纯化靶蛋白参与形成的复合物，为后续寻找0157：H7中毒力蛋白参与形成的复合物奠定了实验基础。
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