作者：张冬冬; 雷白时; 姜军坡; 牛振东; 邱并生...中国木薯醇腈酶汉逊酵母25srdna自主复制序列
摘要：α-醇腈酶（α-hydroxynitrilelyase, HNL）是手性醇腈化合物生物合成十分有用的工具, 能够催化羰基化合物和HCN立体选择性的加工形成手性醇腈化合物。应用PCR扩增得到HNL基因, 连接到pMD18-T 中进行测序, 然后通过EcoRⅠ和NotⅠ将其连接到汉逊酵母表达载体pHMOXGαA中。通过在含有4 mg/mL的G418的YPD培养基上进行筛选获得阳性重组子, 用0.5%的甲醇诱导96 h。酶活测定和SDS-PAGE分析显示HNL在汉逊酵母NCYC495（leu1.1）中得到正确表达, 每毫升发酵液中获得2.015 U的醇腈酶。
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