作者：王沛雅; 郑群; 彭轶楠; 巩晓芳; 王治业; ...寡雄腐霉生防真菌农杆菌遗传转化egfp基因
摘要：【目的】寡雄腐霉（Pythium oligandrum Drechsler）是一种对动、植物和环境无害,兼具杀菌和增产效果的生防真菌。通过研究建立农杆菌介导的寡雄腐霉遗传转化体系。【方法】选用EHA105、AGL-1、LBA4404三种农杆菌菌株对寡雄腐霉进行遗传转化研究,通过对影响遗传转化效果的条件参数试验优化,确立适宜寡雄腐霉遗传转化的农杆菌菌株及转化条件,建立农杆菌介导的寡雄腐霉遗传转化体系。【结果】经研究发现,所选3种农杆菌菌株中EHA105菌株对寡雄腐霉的遗传转化效果最好,其次是AGL-1菌株,LBA4404菌株转化效果不好。EHA105菌株经IM（含300μmol/L AS）诱导培养至OD_（600）=0.6时,与浓度为10~6–10~7个/m L的寡雄腐霉孢子悬浮液以1–10：1的比例混合,在25–26°C以液体振荡的方式避光共培养72 h（pH 5.0,含300μmol/L AS）,寡雄腐霉菌体液体振荡恢复培养24 h,涂布抗性选择平板筛选寡雄腐霉转化子,即可得到寡雄腐霉基因工程菌株,其转化率可达到130个转化子/106个孢子。【结论】本研究首次构建了农杆菌介导的寡雄腐霉遗传转化体系,研究结果可为寡雄腐霉的生防机制及分子育种研究提供技术支撑。
注：因版权方要求，不能公开全文，如需全文，请咨询杂志社
