作者：张国顺; 洪青; 马爱芝; 张晓舟; 李顺鹏富集液六六六脱氯基因克隆和表达
摘要：从长期受六六六污染的土壤中获得高效降解六六六的富集液,其对六六六4种异构体的降解效果均为100%,但至今未能获得纯培养.根据国外报道的六六六脱氯基因linA序列,设计并合成一对引物,通过PCR技术从富集液总DNA中扩增了471bp的基因片段,命名为linN,测序结果表明linN与报道的脱氯基因linA和linA2的同源性达99%,与linA1的同源性达97%.将linN定向克隆到pET-29α表达载体中,转化至E.coliBL21,经IPTG诱导后可表达分子量约17kD的蛋白,表达产物占菌体总蛋白的30%左右;诱导后转化子的降解能力明显提高,粗酶也有很好的降解效果,为进一步分离纯培养和构建多功能农药残留降解菌提供了基础.
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