作者：曾美珍; 王瑾雯; 李镇; 龙綮新; 王珣章spltmnpvp49凋亡抑制多克隆抗体表达时相
摘要：利用PCR方法从斜纹夜蛾核多角体病毒(SpltMNPV)基因组中扩增获得了细胞凋亡抑制基因p49的完整ORF并将其克隆于pMD18-T载体,其序列分析结果与文献报道一致.将基因重组于硫氧还蛋白融合表达载体pThioHis C,在大肠杆菌BL21(DE3)中获得了稳定表达,表达的P49融合蛋白占菌体总蛋白30%左右,主要以包涵体形式存在.分离纯化重组表达的SpltMNPV P49蛋白作为抗原,免疫家兔制备得到效价高于1∶10000的抗重组P49蛋白多克隆抗体.应用制备的抗体对受SpltMNPV感染的Sl细胞中P49蛋白的表达时相进行分析,结果显示P49蛋白在细胞感染后3h内便可检测到,并在整个感染期间维持着低水平表达.
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