作者:梁元存; 刘爱新; 董汉松; 王金生; 张天宇寄生疫霉para1基因克隆大肠杆菌表达耐热性蛋白酶k序列分析烟草黑胫病
摘要:根据已报道的寄生疫霉(Phytophthora parasitica)parA1基因的序列设计引物,从4株寄生疫霉中国菌株(3株来自烟草,1株来自刺槐)中克隆到此基因并进行了重组表达.序列分析表明4株寄生疫霉parA1基因序列高度保守.对表达载体pET-30a(+)双酶切,构建表达Parasiticein蛋白的表达载体pET-eli,用CaCl\-2法转化大肠杆菌(Escherichia coli)BL21,通过诱导在大肠杆菌中进行非融合表达,表达产物在烟草上引起过敏性反应.性质测定表明,表达产物有一定的耐热性,并对蛋白酶K敏感.
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