作者：陈俊生; 董琪; 曹玉祥; 吴志浩atmnnk启动子克隆dna损伤肿瘤
摘要：目的:研究烟草致癌物质4-甲基亚硝胺基-1-3-吡啶基-1-丁酮(NNK)在非小细胞肺癌细胞H1299中对ATM基因表达的影响。方法:采用Western Blot的方法检测不同时间段NNK处理的人非小细胞肺癌细胞H1299中ATM蛋白的表达量;构建ATM启动子萤火虫荧光素酶报告基因质粒;用双荧光素酶报告基因系统检测经NNK处理的H1299细胞中ATM启动子的活性。结果:Western Blot证实H1299细胞中,NNK在增加了p-ATM(表明ATM被激活)的同时抑制了ATM蛋白的表达。结论:测序结果显示ATM启动子质粒构建成功;双荧光素酶报告基因检测系统证实了在H1299细胞中NNK抑制ATM启动子的活性,从而抑制ATM基因的表达。
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