作者:高凌云; 张环环; 查盈盈; 郑超; 汪萌芽脊髓急性分离腹角神经元膜片钳记录新生大鼠
摘要:目的:建立急性分离的脊髓腹角神经元膜片钳记录技术以深人研究脊髓腹角神经元上受体的作用。方法:选用6~11d的新生SD大鼠,麻醉后分离出含腰骶膨大的脊髓,制备切片,给予酶消化,切除背角,将腹角吹打分离出单细胞,进行膜片钳记录。结果:①分离的腹角神经元形态良好,胞体呈纺锤形、三角形和多边形伴多条细长突起;②7个神经元记录到自发动作电位,其细胞电生理特性为:静息电位(-61.88±16.70)mV;阈电位(-47.39±8.02)mV;锋电位幅值(55.79±17.17)mV;超射(8.39±7.70)mV;放电频率(13.54±9.97)Hz;③7个神经元给予1mmol/L谷氨酸诱发电流幅值(324.56±90.54)pA,翻转电位(19.43±12.10)mV;8个神经元给予2mmol/L尼古丁诱发电流幅值(296.91±77.44)pA,翻转电位(29.06±14.88)mV。结论:急性分离脊髓腹角神经元膜片钳记录技术切实可行,可用于脊髓腹角神经元相关调质或药物的作用机理研究。
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