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壳聚糖负载原代培养自体骨髓间充质干细胞修复全层关节软骨缺损实验研究

作者:李军; 张鹏; 卢雪玲; 刘文忠; 范磊组织工程壳聚糖基因修饰骨髓间充质干细胞

摘要:目的利用壳聚糖负载原代培养转化生长因子-β1(TGF-β1)基因修饰自体骨髓间充质干细胞(BM-MSCs)构建组织工程修复体系,观察该体系对实验体软骨缺损修复的成果。方法原代培养并通过表面抗原鉴定BM-MSCs,将pcDNA3-TGF-β1基因导入BM-MSCs制备种子细胞,30只实验兔随机分为1,2,3共3组,分别用壳聚糖、壳聚糖复合BM-MSCs和壳聚糖复合TGF-β1基因修饰BM-MSCs修复全层关节软骨缺损,于术后4周、24周用甲苯胺蓝染色法观察缺损区软骨细胞和软骨基质的形态,蛋白质印迹法检测TGF-β1和Ⅱ型胶原的表达。结果 TGF-β1基因修饰后,BM-MSCs修复软骨缺损时间缩短、新生透明软骨均匀一致,与周围正常透明软骨相容良好,效果优于其它两组;24周后修复区域软骨组织TGF-β1和Ⅱ型胶原表达明显高于其它两组。结论壳聚糖负载转化生长因子-β1基因修饰BM-MSCs构建组织工程修复软骨可用于全层关节软骨缺损治疗,其远期疗效较稳定。

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