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昆明白小鼠精原干细胞的体外培养

作者:王庆忠; 刘慧莲精原干细胞无血清培养基昆明白小鼠

摘要:建立了一种小鼠精原干细胞(spermatogonial stem cells, SSCs) 的分离、纯化和培养体系,主要包括SSCs的差异贴壁分选( differential adherence selection )、无血清培养基和MEF(mouse embryonic fibroblast)饲养层。无血清培养基以Sterepro-34 SFM为基础培养液,补充多种添加剂和GDNF ( glial cell line -derived neurotrophic factor)、可溶性GFRαI ( soluble GDNF family receptor α - 1 )和 bFGF( basic fibroblast growth factor)等因子。昆明白小鼠(KM mice)幼鼠的生精细胞在这一培养体系中能够培养和增殖1个月。RT—PCR检测还表明培养的细胞同时表达Oct4和Sox2,说明SSCs与ESCs两者的自我复制可能享有共同的维持机制.

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