作者：陈红苓 孟英韬 舒剑波 宋力肌萎缩脊髓性多重连接依赖式探针扩增扩增片段长度多态性分析smn基因基因诊断
摘要：目的：应用多重连接依赖式探针扩增法（MLPA）和聚合酶链式限制性片段长度多态性分析（PCR—RFLP）技术对30例临床疑似脊肌萎缩症（SMA）患者进行基因诊断，并对两种方法进行比较。方法：盐析方法提取30例家系成员外周血DNA，常规PCR方法扩增SMN7、8外显子，用DralⅠ和DralⅠ酶切PCR产物，琼脂糖凝胶电泳检测PCR及酶切产物。同时利用MLPA试剂盒P021方法进行验证比较。结果：经PCR—RFLP方法判断22例SMN1第7＋8号外显子纯合缺失患儿和2例Ex7纯合缺失患儿，与MLPA方法一致；其余6例PCR—RFLP方法未见异常家系，经MLPA方法分析发现1例患儿和2例母亲为SMN1外显子7、8杂合缺失携带者：MLPA方法还在SMA家系中发现3例“2＋0”型携带者。SMN2拷贝数在SMA患者中以4、5为主，携带者以2、3为主，正常人以1、2多见，其各拷贝数的频率分布在患者组与携带者组（χ^2=30．694）、患者组与正常人组（χ^2=21．997）中差异有统计学意义（P〈0．01），而在携带者与正常人组差异无统计学意义（χ^2=3．5，P〉0．05）。结论：与PCR—RFLP相比，MLPA更加简单、准确、高效，还能够准确定量SMN1、SMN2，是一种高效的遗传病基因诊断方法。
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