作者:梁东春; 左爱军; 郭刚; 张镜宇大肠杆菌受体igf1型克隆分子基因表达
摘要:目的:提高以大肠杆菌为工程菌制备重组人胰岛素样生长因子1(rhIGF-1)的产率。方法:依据大肠杆菌遗传密码子使用频率表,人工合成3条DNA单链,PCR拼接扩增出适于在大肠杆菌中表达的人IGF-1基因。将此基因克隆入pGEM-T载体进行DNA序列分析后亚克隆入表达载体pBV220,诱导表达,表达产物行聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴定,酶联免疫分析(ELISA)检测表达产物中rhIGF-1的含量。结果:经基因改造后.rhIGF-1主要以包涵体的形式存在于碎菌后的沉淀中,其产率较改造前提高近4倍。结论:所构建的大肠杆菌偏嗜性人IGF-1基因可显著提高rhIGF-1的产率。
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