作者：李杉杉; 刘悦; 唐诗慧; 方步武蒿鳖养阴软坚方酒精性肝纤维化胶原蛋白nrf2
摘要：目的：研究不同提取方案的蒿鳖养阴软坚方对肝纤维化大鼠肝组织中Nrf2/γ-GCS信号转导通路的影响,探讨不同提取方案的蒿鳖养阴软坚方对大鼠肝纤维化的治疗作用。方法：健康Wistar大鼠随机分为8组：正常组、模型对照组、先水后醇60%提取方案组（0.09 mg·kg^-1·d^-1）、先水后醇95%提取方案低、高剂量组（2.59 g·kg^-1·d^-1、8.2 g·kg^-1·d^-1）、水提醇沉低、高剂量组（2.59 g·kg^-1·d^-1、8.2 g·kg^-1·d^-1）及复方鳖甲软肝片组（0.09 mg·kg^-1·d^-1）,每组10只大鼠。酒精性肝纤维化大鼠模型制备成功后,各组按相应药物剂量分别开始治疗,正常组和模型组给予同体积蒸馏水,每日1次,造模10周后处死大鼠,留取标本。酸水解法测定肝组织中胶原蛋白含量;Western blotting检测肝组织Nrf2蛋白与γ-GCS蛋白的表达;光镜观察肝组织免疫组化染色结果。结果：（1）肝组织中羟脯氨酸含量：与正常组比较,模型组大鼠肝组织胶原蛋白含量增高（P〈0.01）;与模型组比较,先水后醇60%提取方案组、先水后醇中、高剂量组以及复方鳖甲软肝片组大鼠肝组织胶原含量均降低（P〈0.05）。（2）肝组织Nrf2蛋白与γ-GCS蛋白的表达：与正常组比较,模型组大鼠肝组织Nrf2蛋白与γ-GCS蛋白表达增高（P〈0.01）;与模型组比较,各治疗组大鼠肝组织Nrf2蛋白与γ-GCS蛋白表达增高（P〈0.01）。（3）肝组织免疫组化染色结果：模型组的Nrf2和γ-GCS蛋白主要在细胞浆中表达,各用药组Nrf2和γ-GCS蛋白均多数在细胞浆和细胞核中表达,汇管区附近也有所表达,但表达量不及胞浆和胞核。结论：提取工艺优化后的蒿鳖养阴软坚方可能通过上调肝组织Nrf2/γ-GCS信号转导通路,增加Nrf2蛋白和γ-GCS蛋白的表达,降低大鼠肝组织肝纤维化程度从而发挥抗肝纤维化的作用。
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