作者:梁晖 李雪 孙紫阳pcr定点诱变转化
摘要:体外定点突变技术是研究蛋白质结构和功能之间复杂关系的有力工具,也是我们在实验室中改造/优化基因常用的手段。蛋白质的结构决定其功能,二者之间的关系是蛋白质组研究的重点之一。对某个已知基因的特定碱基进行定点改变、缺失或者插入.可以改变对应的氨基酸序列和蛋白质结构,对突变基因的表达产物进行研究有助于了解蛋白质结构和功能的关系,探讨蛋白质的结构/结构域。常见体外定点突变的方法有化学诱变、寡核苷酸介导的诱变、盒式诱变和基于PCR的诱变.以PCR为基础的定点诱变(site directed mutagenesis.SDM)技术是近年来得到极大发展的分子生物学方法,广泛用于基因和蛋白质的结构与功能的基础研究。基于PCR的诱变方法有:重叠延伸PCR法、大引物PCR法等。
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