作者：葛林 何津岩 邵洁 东莉洁 方建飞 李晓东 ...g3bp质粒构建down融合蛋白
摘要：目的：构建GST-G3BP Domain 1-5的融合表达质粒，并在大肠杆菌中稳定表达。方法：PCR扩增G3BP Domain 1-5片段，利用限制性内切酶EcoR I和Not I将其连接至载体pGEx-4T-1，将连接产物转化大肠杆菌，挑取单菌落，提取质粒，经PCR和双酶切鉴定后测序。将转化正确的大肠杆菌过夜培养，IPTG诱导融合蛋白表达，immobilized Glu-tathione beads钓取目的蛋白。结果：G3BP Domain 1～5片段均成功连接至载体pGEX-4T-1，在大肠杆菌BL21中可得到稳定表达的融合蛋白。结论：GsT-G3BP Domain 1～5的融合表达质粒构建成功。
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