作者：刘秉乾; 马志方; 李胜芝; 张玥; 王广有; ...异种器官移植衰变加速因子基因重组增强子
摘要：目的:构建含杂合增强子UI的人衰变加速因子(DAF)重组基因的表达载体,应用于转基因动物克服异种器官移植排斥反应的研究.方法:ClaI/EcoRI双酶切质粒pXMT2得到UI增强子插入片段(03 Kb),将其插入pBluescriptⅡ SK+克隆载体的相应酶切位点之间;XbaⅠ/BamHⅠ双酶切质粒pGEM-7zf-DAF,得到含人ICAM-2启动子及DAF cDNA序列的插入片段(3.7 Kb),将其也插入到pBluescript Ⅱ SK+克隆载体的相应酶切位点之间.随后转化细菌,阳性转化菌落质粒抽提及酶切鉴定.设计引物行PCR特异扩增检验.结果:特异性3组酶切重组载体均产生了符合要求的相应条带;PCR扩增出特异的330 bp及321 bp的片断,符合设计要求.结论:含杂合增强子UI的人衰变加速因子(DAF)重组基因的表达载体构建成功.
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