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牛骨骼肌卫星细胞中miR-143互作lncRNA-HZ5的鉴定及其相互调控作用分析

作者:王轶敏; 张蔚然; 张俊星; 刘新峰; 郭宏; ...骨骼肌卫星细胞成肌分化

摘要:为探究miR-143与其互作lncRNA之间的关系及其在牛骨骼肌卫星细胞成肌分化过程中的潜在作用机制,选取两个表达丰度较高miR-143的预测互作lncRNA(lncRNA-HZ5和lncRNA-HZ8)进行研究。采用双荧光素酶试验验证miR-143对预测互作lncRNA的靶向调控作用,采用qRT-PCR技术检测miR-143表达水平改变对预测互作lncRNA表达的影响,并采用qRT-PCR和western blot技术检测干扰互作lncRNA表达后对miR-143表达水平及miR-143靶基因表达水平的影响。双荧光素酶试验结果表明,miR-143可直接调控lncRNA-HZ5的表达;在牛肌卫星细胞中过表达miR-143后,lncRNA-HZ5的表达水平显著下调,而抑制miR-143表达后,lncRNA-HZ5的表达水平显著上调;采用siRNA干扰lncRNA-HZ5的表达,发现抑制lncRNA-HZ5表达能够下调miR-143表达,并上调miR-143靶基因IGFBP5的蛋白水平。研究结果表明,在牛骨骼肌卫星细胞中miR-143可以和lncRNA-HZ5发生相互调控作用,其对牛肌卫星细胞成肌分化的调控作用可能是通过互作来完成的。

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