作者:罗深恒; 白喜龙; 景磊; 李玉银; 刁爱坡tmepai溶酶体稳定性氯喹吖啶橙
摘要:本研究旨在构建稳定表达TMEPAI细胞株,研究TMEPAI表达对溶酶体稳定性的影响.采用基因工程技术构建重组表达载体pEF-IRES-TMEPAI-Flag,经酶切、PCR检测及测序鉴定,证实表达质粒构建正确.将表达质粒转染A549肺癌细胞,经抗生素puromycin筛选单克隆阳性细胞株,采用免疫印迹实验(Western blot)和免疫荧光技术证实稳定表达TMEPAI细胞株构建成功.通过MTT法、流式细胞技术和吖啶橙染色实验表明,TMEPAI蛋白能够增强溶酶体的稳定性.
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