作者：傅龙龙; 周芳; 安琪; 张开舒; 童越; 许剑...精子冷冻生育力保存线粒体dna
摘要：目的 探讨常规精液冷冻技术对人类精子线粒体DNA的影响。方法 收集符合精子库捐精条件的正式志愿者精液样品,将每份样品分为2份：1份进行精液冷冻复苏处理,为实验组;1份新鲜精液,为对照组。采用Markler计数板联合CASA法评估冷冻复苏前后精子活力;两组精液均采用实时荧光定量PCR和长链PCR技术,分别检测精子线粒体DNA的拷贝数和完整性。结果 共收集22份精液标本,纳入志愿者年龄为（27.8±3.0）岁,禁欲天数（6.1±0.9）d;精液体积（5.0±1.5）ml,精子浓度（75.8±15.8）×106/ml,前向运动精子百分比为（68±6）%,总活动精子复苏率为（72±8）%。冷冻保存后,精子活力显著降低：前向运动精子百分比减少[（49.0±6.5）%vs.（68.0±6.1）%,P〈0.05）,平均路径速率（VAP）[（35.8±6.8）vs.（46.8±9.5）,P〈0.05]、直线速率（VSL）[（27.3±3.3）vs.（35.1±8.3）,P〈0.05]和曲线速率（VCL）[（57.6±6.9）vs.（91.8±10.2）,P〈0.05]较前下降。与新鲜精液相比,冷冻复苏后精子的线粒体DNA拷贝数显著增加[（10.12±8.41）vs.（5.66±5.53）,P〈0.05],完整性比较无统计学差异[（29.69±15.04）vs.（32.78±16.0）,P=0.077]。结论 在正式捐精志愿者人群内,常规精液冷冻技术降低精子活力,增加人类精子mtDNA的拷贝数,但未显著改变mtDNA的完整性。
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