作者：周团萍; 邵丽; 徐祎欣; 孟艳; 刘凯鲁; 高...卵丘细胞aifm2fdx1线粒体代谢
摘要：目的检测小鼠卵母细胞体外、体内成熟过程中卵丘细胞（CCs）上线粒体相关凋亡因子2（AIFM2）和铁氧化还原蛋白1（FDX1）的表达,探讨其在卵母细胞成熟中的作用。方法从3周龄ICR雌性小鼠获取体内成熟卵丘-卵母细胞复合体（IVV-COCs）以及GV期卵丘-卵母细胞复合体（GV-COCs）,并将GV期体外培养至MⅡ期卵丘-卵母细胞复合体（IVMCOCs）。收集对应的CCs,分成GV-CCs、IVM-CCs和IVV-CCs 3组。实时定量逆转录聚合酶链反应检测AIFM2和FDX1mRNA水平的表达,以GAPDH为参照;激光共聚焦免疫荧光技术观察COCs的AIFM2和FDX1的亚细胞定位。结果IVM-CCs和IVV-CCs的AIFM2mRNA相对表达量[分别为（0.72±0.01）和（0.67±0.02）]显著高于GV-CCs组[（0.10±0.06）]（P〈0.01）;同样,IVM-CCs和IVV-CCs的FDX1mRNA相对表达量[分别为（1.58±0.35）和（1.82±0.34）]也显著高于GV-CCs组[（0.10±0.03）]（P〈0.01）;而IVM-CCs和IVV-CCs的AIFM2和FDX1表达水平均无显著性差异（P〉0.05）。免疫荧光显示,AIFM2和FDX1主要定位于CCs胞质中,在GV-COCs中各层均有表达,且GV期卵母细胞中也有表达;IVMCOCs和IVV-COCs中表达阳性的细胞数目较GV期增加。结论卵母细胞成熟后,其CCs上AIFM2和FDX1的表达升高,表明AIFM2和FDX1参与了卵母细胞成熟过程,有望作为预测卵母细胞成熟的生物标记物。
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