作者：吴彤华 朱元昌 成金泉 黄韵 卢燕玲 李红...植入前遗传学诊断全基因组扩增单倍型分析等位基因脱扣
摘要：目的 建立可有效监测污染和等位基因脱扣（allele dropout,ADO）的可靠的葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（G6PD）缺乏症单细胞基因诊断体系。方法 获取正常G6PD基因型个体及G6PD基因突变杂合子的单个淋巴细胞,在全基因组扩增（whole genome amplification,WGA）的基础上,应用多重SNaPshot技术检测25个已报道的中国人群G6PD基因突变位点,同时联合针对Xq28上6个短串联重复序列（short tandem repeat,STR）位点的单倍型分析技术辅助分析结果。结果 共检测60个正常和96个杂合子单淋巴细胞,WGA扩增效率为94.23%,成功扩增的WGA产物在后续基因检测的总扩增效率和总ADO率分别为89.37%和13.74%;8个基因位点的扩增效率和ADO率均有统计学差异（P总〈0.05）;发生G6PD基因ADO的15例G6PD杂合子单淋巴细胞中,均未同时出现6个STR位点全部扩增失败或ADO现象;所有样本的STR位点检测结果除目的片段的信号峰外,均未出现其他峰信号。结论 联合SNaPshot和单倍体分型技术所建立的单细胞G6PD基因诊断体系,在G6PD基因分型的同时,还可提示是否存在污染或ADO,最大程度保证诊断结果的可靠性,减少误诊率,可望取代传统的性别选择,实现真正意义上的G6PD缺乏症植入前遗传学诊断。
注：因版权方要求，不能公开全文，如需全文，请咨询杂志社
