作者：金晓艳 蒋玥 山惠枝 张慧 颜桂军 孙海翔klf12子宫内膜间质细胞蜕膜化
摘要：目的人子宫内膜间质细胞蜕膜化标志蛋白胰岛素样生长因子结合蛋白-1（insulin—likegrowthfactorbindingprotein-1，IGFBP-1）参与调控月经周期、排卵、蜕膜化、胚胎种植以及胎儿生长等生理过程，本研究旨在探索锌指蛋白KLF12对人子宫内膜间质细胞体外蜕膜化过程中IGFBP-1表达的影响。方法制备Ad—Flag—KLF12重组腺病毒，通过荧光定量聚合酶链式反应（PCR）和酶联免疫吸附试验（EI，ISA）结合重组腺病毒介导的KLF12过表达实验，阐述人子宫内膜间质细胞体外蜕膜化过程中KLF12对IGFBP-1表达调控作用。结果成功获得滴度为2×10^11ifu／ml的重组KI，F12腺病毒，该腺病毒可在人子宫内膜间质细胞中高表达Flag—KLF12融合蛋白；体外分离培养的人子宫内膜间质细胞经8-Br—cAMP和醋酸甲羟孕酮（medroxyprogesteroneacetate，MPA）联合诱导蜕膜化后，KLFI2的mRNA表达随着诱导时间延长逐渐降低，72h降低最明显，较未刺激降低约70％；过表达KI。F12显著抑制8-Br-cAMP和MPA诱导的人子宫内膜间质细胞中IGFBP-1mR—NA的表达，并以时间依赖的方式明显抑制IGFBP-1的分泌（P〈0．01）；过表达KEF12明显抑制人子宫内膜间质细胞体外蜕膜化过程中IGFBP-1启动子转录活性。结论锌指蛋白KLF12抑制人子宫内膜间质细胞体外蜕膜化过程中IGFBP-1的表达与分泌。
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