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胰岛素和睾酮对Ishikawa细胞葡萄糖转运蛋白4表达的影响

作者:王玮 郝桂敏 李晓冬 徐素欣 曹金凤ishikawa细胞葡萄糖转运蛋白4多囊卵巢综合征胰岛素睾酮

摘要:目的探讨胰岛素(INS)和睾酮(T)对多囊卵巢综合征(PCOS)子宫内膜腺上皮细胞生长的影响和葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)表达的调节机制。方法体外培养Ishikawa细胞,予不同浓度INS(90、60、30、3、0.3U/L)或T(10^-2、10^-4、10^-5、10^-6、10^-7mmol/ml)刺激Ishikawa细胞48h,MTT法检测INS、T对Ishikawa细胞生长的作用;免疫细胞化学检测GLUT4蛋白在Ishikawa细胞定位表达;分别以30U/LINS和10^-5mmol/mlT刺激Ishikawa细胞24和48h,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法测定INS和T对Ishikawa细胞GLUT4 mRNA表达的影响。结果(1)不同浓度的INS均可促进Ishikawa细胞的生长,随着INs浓度的增加,INS促进Ishikawa细胞生长作用越强,INs浓度自0.3~30U/L时,Ishikawa细胞生长依次加强,与对照组相比均有显著性差异(P〈0.01)。INS浓度达60、90U/L时,细胞生长状况与INS浓度为30U/L相似。不同浓度的T均可抑制Ishikawa细胞的生长,随着T浓度的增加,T抑制Ishikawa细胞生长作用越明显。T浓度自10^-7、10^-6、10^-5mmol/ml,Ishikawa细胞生长依次减弱,与对照组相比均有显著性差异(P〈O.01,P〈0.05),T浓度达10^-4、10^-2mmol/ml时,细胞生长抑制状况与T浓度10^-5mg/ml相似。(2)GLUT4蛋白,定位表达于Ishikawa细胞的细胞浆内。(3)Ishikawa细胞中GLUT4 mRNA表达,在INS组和T组均较对照组减弱(P〈0.01,P〈0.05),INS组比T组减弱更明显(P〈0.05),且INS和T作用24和48h GLUT4 mRNA表达无显著性差异(P〉0.05)。结论不同浓度INS和T均可影响Ishikawa细胞生长,并降低GLUT4 mRNA的表达,推测PCOS高胰岛素、高雄激素血症的病理生理特性有可能影响子宫内膜的代谢过程,与子宫内膜的病变相关。

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