作者：王增艳 何方方 孙正怡 陈颖卵母细胞玻璃化冷冻环纺锤体小鼠
摘要：目的评价ED15（15％ethylene glycol，EG＋15％ dimethylsulphoxide，DMSO）冷冻环玻璃化法冻存小鼠成熟卵母细胞的效果，以及对其纺锤体形态、染色体分布和发育潜能的影响。方法分别以小鼠新鲜成熟卵母细胞为对照组，玻璃化冷冻复苏卵母细胞为冷冻组。玻璃化冷冻以冷冻环为载体，以乙二醇（EG）及二甲亚砜（DMSO）联合作冷冻保护剂。解冻后观察细胞存活情况并对解冻后培养0、1、2h的卵母细胞行纺锤体及染色体免疫荧光染色，激光共聚焦扫描显微镜观察；其余卵母细胞行体外受精培养，计算受精率、囊胚形成率。结果冷冻组成熟卵母细胞存活率为98．2％，复苏后卵母细胞培养0、1、2h的纺锤体形态正常率及染色体分布正常率与对照组比较无显著性差异（分别为87．0％、90．9％、90．3％ vs 95％，P〉0．05；91．3％、95．4％、93．5％ vs 90％，P〉0．05）；冷冻组受精率及囊胚形成率与对照组比较均无显著性差异（81．3％ vs 85．2％，P〉0．05；76．1％ vs 75．4％，P〉0．05）。结论ED15冷冻环玻璃化法冻存小鼠成熟卵母细胞复苏存活率高，对其纺锤体形态、染色体分布及发育潜能无明显影响。
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