作者：陈晓林 范勇 孙筱放muscularatrophypcr
摘要：目的：建立结合多重链置换扩增（multiple displacement amplification,MDA）全基因组扩增法和等位基因特异性PCR（allele-specific PCR,AS-PCR）对单细胞进行脊髓性肌萎缩（spinal muscular atrophy,SMA）诊断的方法。方法：对脊髓性肌萎缩症运动神经元生存基因（survival motor neuron gene1,smn1）7号外显子纯合缺失皮肤成纤维细胞及正常的皮肤成纤维细胞使用MDA法进行全基因组扩增,使用AS-PCR检测扩增产物的smn1和smn2基因,同时扩增D5S435、D5S351这2个微卫星位点,评估扩增效率、等位基因脱扣（allele dropout,ADO）率及污染检测。结果：对18个SMA细胞和21个smn1基因正常的细胞进行扩增。smn1和smn2基因扩增成功率分别为90.4%（19/21）和94.8%（37/39）。2个微卫星的扩增成功率为82.1%（32/39）和88.9%（16/18）,ADO率分别为16.22%（6/37）和12.5%（2/16）。总扩增成功率为88.89%（104/117）,总ADO率为15.09%（8/53）。结论：建立了结合MDA和等位基因特异性PCR对单个细胞进行smn1、smn2基因的扩增方法,为SMA单细胞植入前诊断奠定了基础。
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