作者：邵飞; 尹海波; 赵容; 陶玲; 陈志伟穿龙薯蓣ssr体系优化正交设计单因素试验
摘要：目的 建立穿龙薯蓣ISSR-PCR扩增的稳定体系。方法 利用单因素及正交试验设计的方法对影响穿龙薯蓣ISSR-PCR扩增效果的d NTPs浓度、引物浓度、模板DNA用量Taq DNA聚合酶用量、Mg^2＋浓度进行优化。结果 穿龙薯蓣的ISSR-PCR的20μl最佳反应体系为：2.0μl 10×Taq Buffer,2.0 mmol/L Mg^2＋,0.225mmol/L d NTPs,1.5 UTaq DNA聚合酶,1.0μmol/L引物,2.0 ng/μl DNA模板,dd H2O补齐。应用该反应体系筛选出来适用于穿龙薯蓣ISSR扩增的12条引物,并确定了各引物的最佳退火温度。结论 确立了一个适用于穿龙薯蓣ISSR-PCR扩增的体系。
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