作者:商晓慧; 曲晨龙; 张建鹏; 刘小宇; 焦炳华...光棘球海胆壳多糖正交实验衍生化高效液相色谱
摘要:目的建立海胆壳多糖提取工艺及柱前衍生化条件。方法水提醇沉法提取壳多糖,采用正交实验优化提取工艺;柱前衍生化后,利用高效液相色谱法检测单糖组分,对海胆壳多糖的脾淋巴细胞免疫抑制活性实验进行了初步探索。结果海胆壳多糖最佳提取工艺为15倍的水,70℃水浴回流1 h,提取3次;100μl壳多糖水解液,加入50 ml Na OH(0.2 mol·L^-1),40μl l-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(0.5 mol·L^-1),混匀后70℃水浴30 min,取出冷却,加入50μl HCl(0.2 mol·L^-1)中和,200μl氯仿萃取3次。药理学实验表明海胆壳多糖溶液在浓度1-10μg·ml^-1范围时显示出一定的免疫活性。结论本次实验成功建立海胆壳多糖的提取工艺和衍生化条件。
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