作者:刘小莉; 普春霞; 杨耀文; 钱子刚胡黄连正交实验单因子
摘要:目的优选胡黄连稳定的ISSR—RCR反应体系。方法采用4因素(dNTRs、Mg^2+、Taq酶、引物)4水平的正交实验和单因子梯度优化相结合的方法。结果适于胡黄连的25V1ISSR—PCR反应体系中各因素最佳浓度分别为10×buffer 2.5μl,dNTPs 150μmol/L,Mg^2+ 1.5mmol/L,Taq酶1U,引物0.5μmol/L,DNA 20 ng或10×buffer 2.5μl,dNTPs 150μmol/L,Mg^2+ 2mmol/L,Taq酶0.5U,引物0.4μmol/L,DNA 20 ng。结论对于胡黄连ISSR—RCR试验,一次正交实验完全可以建立起满足要求的PCR体系。
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