作者:成家茂; 潘志恒; 谢瑶; 何宏文; 曲怀刚大黄虫丸肝纤维化肝星状细胞旁分泌
摘要:目的观察大黄[庶虫]虫丸经旁分泌途径对大鼠肝星状细胞增殖及其表达TGF-β1基因的影响。方法采用Nycodenz分离液非连续密度梯度离心法同步分离急性CCl4损伤模型大鼠和正常大鼠肝的枯否细胞(KC)和星状细胞(HSC)。在制备正常鼠血清和大黄[庶虫]虫丸药物血清的基础上,将它们分别加入KC培养板内作用48h后制备成正常鼠KC条件培养液(NKCCM)和损伤鼠KC条件培养液(KCCM)。将NKCCM和KCCM作用于活化的HSC 24h后,采用MTT法和3H—TdR掺入法检测HSC增殖的变化;采用半定量RT—PCR法扩增TGF-β1 mRNA以检测HSC表达TGF-β1基因的情况。结果旁分泌组各组的HSC增殖幅度及TGF-β1基因的相对表达量较正常对照组NKCCM组均明显增加(P〈0.05或0.01)。同时旁分泌组中,含药血清作用的5%,10%和20%KCCM组较无药物血清作用的0%KCCM组HSC的增殖能力及TGF-β1基因的相对表达量则下降,且随药物浓度的升高逐渐降低,其组间差别有统计学意义(P〈0.05或P〈0.01)。结论大黄蜃虫丸可明显抑制经旁分泌途径活化的大鼠Hsc的增殖及TGF-β1基因的表达,且其抗肝纤维化效应与药物剂量间存在一定的依赖关系。
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