作者:王晓丽; 钟民涛; 李星云; 曹婧; 宁安红; ...香菇cdna文库5srrna非转录间隔区2距离树库容
摘要:目的构建香菇C91—3cDNA文库。方法低速离心法收集香菇C91—3菌丝体发酵液中的菌丝,提取总RNA,巢式PCR扩增5SrRNA非转录间隔区2片段并测序鉴定:纯化mRNA,以mRNA为模板进行反转录反应;产物与pBlue—ScriptIISK(+)载体连接,并转化E.coilDHIOB,检测库容及插入片段。结果香菇C91—3cDNA文库初始库容为7.2×10^6cfu,插入片段长度0.4~3.4kb,平均1.5kb。结论成功构建香菇C91~3cDNA文库,适合用于研究香菇蛋白的编码基因。
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