作者:张岳峰; 万里翔; 侯大斌乌头简单序列重复区间优化
摘要:目的保证乌头ISSR—PCR的稳定性、提高对乌头遗传多样性,亲缘关系分析、种质鉴定的可靠性。方法收集西南地区23个乌头材料,以Mg^2+,dNTP,引物和聚合酶建立L9(3^4)正交设计,并同时考察模板和甲酰胺浓度及退火温度,建立适宜的ISSR—PCR体系。结果以Mg^2+2.0mmol/L、dNTP0.25mmol/L、引物0.3μmol/L、rTaq酶1u、模板1.5ng/μl、甲酰胺2%及退火温度(Tm-3)℃的ISSR反应体系最优。结论实验建立的ISSR—PCR体系反应稳定,能用于乌头6^TSSR奔析
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