作者：周蕾; 卢颖辉; 徐斌; 李川; 龚德华枸橼酸浓度单核细胞细胞因子
摘要：目的：通过体外细胞培养,观察不同浓度枸橼酸对内毒素（LPS）诱导的单核细胞分泌细胞因子功能的影响。方法：采用标准方法体外培养人类单核细胞株（THP-1）,加入适量枸橼酸三钠（TSC）使其体外培养液TSC浓度分别为0、0.5 mmol/L、1.0 mmol/L,并给予不同浓度LPS（0.05μg/ml、0.1μg/ml、1μg/ml）刺激,分别于刺激后6h、12h、24h、48h用CCK-8试剂盒测定细胞活性、ELISA试剂盒测定上清液细胞因子白细胞介素6（IL-6）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）水平及血气分析仪测定培养基内离子钙（Ca~（2＋））水平。使用正常培养条件下的单核细胞做为对照组。结果：不同浓度TSC对单核细胞活性无抑制作用（P〉0.05）,但对不同时间点LPS诱导的单核细胞分泌细胞因子（TNF-α和IL-6）功能有一定影响,培养基TSC浓度0.5 mmol/L和1.0 mmol/L时,培养12h和24h TNF-α的分泌量显著高于对照组（P〈0.01）;TSC浓度为0.5 mmol/L时,IL-6在24h开始出现分泌增高趋势,48h达到峰值（P〈0.05）,TSC浓度1.0 mmol/L显著抑制IL-6分泌（P〈0.01）。结论：本实验采用的TSC浓度不存在细胞毒性,单核细胞在此浓度下,受LPS刺激时表现出TNF-α分泌亢进的现象,而IL-6的分泌则表现出TSC低浓度下亢进,高浓度下受抑制的趋势。
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