作者：陈炬莹; 陈晓耕乳腺癌细胞系肿瘤干细胞sp细胞流式细胞仪
摘要：目的通过乳腺癌细胞系及其干细胞的培养，化疗药干预和流式细胞仪筛选鉴定，探讨不同乳腺癌细胞系中CD44＋CD24-/low细胞比例，及富集乳腺癌干细胞相关亚群的方法。方法通过细胞培养乳腺癌细胞系MCF-7、MDA—MB-231，观察生长曲线，比较化疗药物干预下生长情况；利用流式细胞仪检测两种乳腺癌细胞系中CD44＋CD24-/low细胞比例；无血清悬浮培养，化疗药（多西紫杉醇、表阿霉素）干预这两种乳腺癌细胞系，观察其是否形成细胞球。结果（1）MDA—MB-231细胞系倍增时间短，生长速率高于MCF-7细胞系；（2）MCF-7细胞系中可能存在较大比例肿瘤干细胞，其对化疗抵制，能自我更新；（3）化疗敏感性用两独立样本t检验，MCF-7细胞，差异没有统计学意义；MDA—MB-231细胞，差异有统计学意义，提示MDA—MB-231细胞系对该方案化疗较敏感；（4）无血清悬浮培养，MDA—MB-231细胞系未发现明显细胞球；MCF-7细胞系初次无血清培养约6天出现细胞球。加入化疗药筛选后两种细胞，见大部分肿瘤细胞逐渐死亡，未发现明显细胞球；（5）流式细胞仪检测，MCF-7、MDA—MB-231两种细胞系中主要是CD44＋CD24＋亚群和CD44＋CD24＋亚群，CD44＋CD24-/low细胞比例分别2．07％和0．20％。结论（1）MDA—MB-231细胞系增值较快，恶性度相对较高，其对TA联合化疗药物较敏感；MCF-7细胞系中可能存在少量肿瘤干细胞，对化疗抵制，能自我更新；（2）无血清培养液培养MCF-7细胞系能形成悬浮细胞球；流式细胞仪检测两种细胞系中CD44＋CD24-/low细胞比例小；（3）CD44＋CD24-/low表型可能不是乳腺癌干细胞唯一特异性的表面标志。
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