作者：王厚东; 沈忠; 杨关根; 鲁振锋; 陈金明; ...rna小分子干扰基因沉默细胞增殖细胞运动细胞凋亡
摘要：目的探讨中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白（neutrophils gelatinases-associated lipocalin,NGAL）的基因沉默作用对结肠癌细胞增殖、迁移和凋亡的影响。方法采用转染试剂盒ribo FECTTMCP Transfection Kit负载NGAL siRNA转染结肠癌细胞株HT-29（转染组）,以未转染的HT-29细胞为对照组。实时荧光定量PCR和ELISA分别检测细胞NGAL mRNA水平和细胞培养上清液中NGAL蛋白水平,采用细胞划痕实验、Promega Cell Proliferation Assay G3580和BD C6流式细胞仪分别检测细胞迁移、增殖和凋亡情况。结果 HT-29细胞转染NGAL siRNA72 h后,转染组NGAL mRNA水平为对照组的0.123（P〈0.05）;转染48 h后,转染组细胞培养上清液中NGAL蛋白为（0.328±0.055）μg/L,低于对照组的（1.071±0.143）μg/L（t=8.205,P=0.001）。转染48 h后,转染组凋亡率为（18.87±1.65）%,低于对照组的（11.93±1.90）%（t=-4.752,P=0.009）。转染24 h后,转染组细胞迁移率为对照组的（23.35±6.35）%（t=11.930,P〈0.01）。转染48 h后,转染组细胞增殖率为对照组的（90.00±5.30）%（t=1.983,P=0.118）。结论 NGAL siRNA可以抑制结肠癌细胞NGAL基因和蛋白的表达,抑制细胞迁移,促进细胞凋亡。
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