作者：胡志; 马慧; 范粉玲; 刘文娟; 谢航肺动脉高压低氧人肺动脉内皮细胞nlrp3炎性小体信号通路
摘要：目的 考察ROS/ALOX5/NLRP3信号通路相关蛋白激活在低氧所致肺动脉内皮细胞增殖中的作用。方法 将人肺动脉内皮细胞分别在常氧状态（21%O2）和低氧状态（1%O2）下培养24、48、72及96小时,同时低氧状态下分别设立活性氧（ROS）清除剂Trolox组和ALOX5抑制剂齐留通组。采用CCK-8法检测细胞增殖率的改变,活性氧探针H2-DCFA检测低氧状态下肺动脉内皮细胞内ROS的变化,Western blot法分别检测低氧状态及加入Trolox或齐留通干预后ALOX5、NLRP3和Caspase-1蛋白表达的变化。结果 肺动脉内皮细胞在低氧作用48、72及96 h后可见增殖显著,分别达（135.6±29.4）%、（185.3±21.7）%及（212.3±39.0）%。同时,细胞内ROS在24、48及72 h可检测到显著增加,96小时后基本恢复正常。ALOX5、NLRP3和Caspase-1蛋白随低氧时间增加而表达增多。预先加入ROS清除剂Trolox和ALOX5抑制剂齐留通均可抑制NLRP3炎性小体相关蛋白NLRP3和Caspase-1的表达,且细胞增殖率也显著降低。结论 ROS/ALOX5/NLRP3信号通路在低氧所致的肺动脉内皮细胞增殖中显著激活,抑制这一通路可显著减少低氧所致的内皮细胞增殖。
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