作者:张世国; 胡成进细胞培养rna提取法异硫氰酸胍异丙醇
摘要:近年来,随着生物学技术的发展,人们对各种疾病的发生、发展及预后等研究,已从蛋白质水平进入基因水平,而在基因研究的相关技术中,越来越多地以RNA为研究内容,以培养细胞为实验对象.因此,细胞中总RNA的提取与纯化是分子生物学技术中的重要步骤,在差异显示技术、RT-PCR、cDNA合成等实验中,RNA的纯度和完整性是实验的关键.由于RNA极易被广泛存在的RNA酶降解,在实验中如何防止RNA酶的污染和抑制RNA酶的活性是需解决的重要问题.我们结合目前几种RNA提取方法[1~3],建立了一种快速有效的异硫氰酸胍-酚-氯仿一步抽提、异丙醇沉淀单层培养细胞总RNA提取法.
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