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两株猪HEV病毒株全基因组序列分析

作者:付红伟杨桂芳李昕戊型肝炎病毒hev基因分型hev基因哑型

摘要:目的测定两株从新疆地区分离的猪戊型肝炎(hepatitis E,HEV)病毒株全基因组序列,并在全基因组水平上分析猪HEV病毒株与人源HEV的关系。方法设计HEV基因4型通用PCR引物,用巢式反转录聚合酶链反应法(reverse—transcription—nested polymerase chain reaction,RT—nPCR)分段扩增猪HEV病毒株CHN—XJ—SW13和CHN—XJ—SW33的全基因组序列;用cDNA末端快速扩增法(rapid amplification of cDNA,RACE)扩增其末端序列;对扩增的目的片段进行克隆测序,并对拼接后的基因组进行序列比对和进化分析。结果除3'polyA尾外,CHN—XJ—SW13和CHN—XJ—SW33基因组全长分别为7241bp和7238bp,两病毒株均与基因4型HEV核苷酸同源性最高,为82.8%~95.5%;与基冈1~3型HEV核苷酸同源型仅为72.1%-74.9%。CHN—XJ—SW13与分离自湖南、上海的猪HEV病毒株(HC10—44,HC1—88,estw2,ch—shsw1和SWXJ03)共同组成新的HEV基因亚型:4n亚型,且该病毒株与香港人HEV(HK104—2004)在ORF1部分核苷酸序列同源性高达94.6%。基因进化分析显示CHN—XJ—sw33属于HEV4a亚型,在全基因组水平上与JKO—ChiSai98C核苷酸同源性高达95.5%。结论本文研究成功完成了两株猪HEV病毒株全基因组序列的鉴定,其中CHN—XJ—SW13为我国本土的HEV新培因亚型;在全基因组水平上猪HEV与人HEV高度同源的特性为基因4型HEV从猪到人传播的可能提供了更可靠的证据。

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