作者：王蓉; 张振华; 田拥军; 赵西平; 杨东亮乙型肝炎病毒核心抗原酶联免疫吸附实验western原核表达质粒原核表达载体病毒核心蛋白基因工程技术blot检测核蛋白表达核心区基因免疫反应性截短型基因片段方法应用诱导表达纯化宿主菌nta特异性灵敏度
摘要：目的构建乙型肝炎病毒核心区原核表达质粒并进行原核蛋白表达、纯化和鉴定.方法应用基因工程技术将编码截短型乙型肝炎病毒核心蛋白(HBcAg 1～144aa)的基因片段装入原核表达载体pRSET-B内,在宿主菌B121(DE3)plysS内进行诱导表达,运用Ni-NTA方法纯化目的蛋白.采用酶联免疫吸附实验(ELISA)及Western blot检测蛋白的灵敏度和特异性.结果成功地构建了含截短型乙型肝炎病毒核心区基因的质粒,并纯化得到了分子量约为19.5kD的目的蛋白.结论本方法所获得的重组截短型乙型肝炎病毒核心抗原(1～144a)纯度高,免疫反应性强.
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