作者:徐晓静; 殷为民; 赵李祥sybrgreeni定量反转录pcrompt表达
摘要:目的建立ompT基因表达水平解析的定量方法。方法利用嵌合荧光(SYBR GreenI)标记,以编码甘油醛3-磷酸脱氢酶的看家基因gapA为内参基因,建立用于ompT基因表达水平解析的两步法实时定量反转录PCR。通过大肠杆菌的鸡体内感染模型,获取感染菌体,利用该定量PCR对感染菌体中ompT基因在感染鸡体内的表达水平进行了解析。结果成功建立了ompT基因表达水平解析的定量PCR。定量PCR结果显示,相对于体外培养,APECE058株ompT在鸡体内的表达上调了6.69倍。结论建立的ompT基因定量PCR方法稳定、可靠,可用于ompT表达水平的解析。
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