作者：尤俊昊; 黄晓华; 赵爱国漆树漆酶酶活abts金属离子
摘要：以生漆原液为原料,用冷丙酮和硫酸铵溶液成功提取漆树漆酶后对所提溶液蛋白浓度进行了测定和SDS-PAGE凝胶电泳检测,漆树漆酶蛋白分子量约为100 Kda。并以2,2′-连氮-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸(简称ABTS)为底物,测定漆树漆酶活性,探讨了pH、温度、金属离子种类及浓度对漆树漆酶活性的影响。结果表明,以ABTS为底物的测定漆树漆酶酶活最佳条件为:pH值为2.6的柠檬酸和磷酸氢二钠缓冲溶液为反应溶液,反应温度35℃。铜、镍离子在低浓度时(小于10 mM)对漆树漆酶酶活起激活作用,其中铜离子激活作用最强;三价铁离子对漆树漆酶酶活起强抑制作用;低浓度(小于10 mM)钙、镁、锌、钾离子对漆树漆酶酶活影响不大;在高浓度时,各金属离子均不同程度抑制漆酶酶活,对漆树漆酶活性抑制作用近似饱和时,金属离子浓度对漆树漆酶活性的影响不再突出。
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